艰难梭菌（Clostridium difficile)是梭菌属的一种专性厌氧菌，对氧十分敏感，很难分离培养，故得名。发现于1935年，但直到1977年发现本菌与临床长期使用某些抗生素（氨苄青霉素、头孢霉素、红霉素、氯林可霉素等）引起的伪膜性肠炎有关，方被重视。
艰难梭菌广泛分布于自然生境中，如土壤、干草、沙、一些大型动物（牛、驴和马）的粪便，及狗、猫、啮齿动物和人的粪便，除此之外还大量存在于水和动物的肠道中婴儿的粪便中常含有艰难梭菌，为新生儿肠道中正常菌群，大约50%12月龄婴儿的肠道中有艰难梭菌，2岁以上儿童的带菌率大约为3%，但此菌在健康成人中出现频率较低，无症状带菌的成人在瑞典是1.9%，在日本为15.4%。
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| 艰难梭菌 |
生物学特性
形态与染色
粗长杆菌，大小（1.3~1.6）μm*（3.6~6.4）μm，能运动或不能运动，运动性菌株为周毛菌。芽胞为卵圆形，位于菌体次极端，无荚膜，革兰染色阳性，但培养2天后有转为革兰阴性的趋向。
培养特性
本菌为严格的专性厌氧菌，用常规的厌氧培养法不易生长。生长温度为25℃~45℃，而最适温度为30℃~37℃。在血琼脂、牛心脑浸液琼脂及CCFA等平板，经48小时培养后，菌落的直径3~5mm，圆形，略凸起，白色或淡黄色、不透明、边缘不整齐、表面粗糙。在血平板上不溶血，在卵黄琼脂平板上不形成乳浊环。CCFA平板上生长的菌落在紫外线照射下可见黄绿色荧光。本菌经肉汤培养2天以上，菌体有溶融现象。
耐药性
本菌对氨苄西林、头孢菌素、林可霉素、克林霉素、红霉素、四环素耐药。长期使用这些抗生素，尤其是克林霉素，容易引起菌群失调，使耐药的艰难梭菌被药物选择出后大量繁殖而致病，导致抗生素相关性腹泻。
艰难梭菌引起的疾病：
1. 伪膜性肠炎（pseudomenbranous colitis，PMC）：临床表现为腹泻、腹痛、伴有全身中毒症状，症状突然开始，并伴随血压低，严重时能致死。通常还伴有发烧，白细胞增多，之后可导致死亡，是很严重的一类疾病。
2.抗生素相关性腹泻（antibiotic-associated diarrhoea)： 在体内的潜伏期为5-10天，之后导致大量的棕色或水状腹泻，持续1周左右。
除上述疾病外，艰难梭菌尚可引起肾盂肾炎、脑膜炎、腹腔及阴道感染、菌血症和气性坏疽等。近年来该菌已成为医院内感染的病原菌之一，日益被人们所重视。
发病机理：
艰难梭菌是由于服用抗生素后，打破了肠内菌群的平衡，从而导致艰难梭菌累计了大量的数量，产生大量的外毒素A和B。外毒素A由肠道毒素和细胞毒素组成。外毒素可绑定黏膜细胞从而导致出血。而外毒素B是一种细胞毒素，在体内外毒素B不能与黏膜细胞直接绑定，因为外毒素B只能与破坏的细胞绑定，导致更大的破坏。大多数艰难梭菌种属都产生这两种毒素，从而在不同时期产生不同的作用，在初期外毒素A首先与黏膜细胞绑定，造成初级的破坏，然后外毒素B进而发挥更大的破坏。
传播途径：
艰难梭菌是主要的院内腹泻的代表，其中通过手，器材和染菌杂物传播。其孢子可在环境中幸存几年。环境的检测中通常可检测出艰难梭菌。
艰难梭菌感染与抗生素：
艰难梭菌往往感染住院病人，并在体内定植。一次研究发现，399个患者入院时检测不到艰难梭菌，21%在住院期间发生了艰难梭菌腹泻。所有的抗生素及一些化疗药物与艰难梭菌引起的腹泻或假膜状结肠炎有关，最常见的是氨苄青霉素、克林达霉素和头孢菌素。可见，抗生素使用不当与艰难梭菌腹泻密切相关，也是住院病人最常见的肠道感染的病因。
诊断：
胶乳(凝集)试验（latex test）：
胶乳绑定抗体后，加入过滤后的粪便滤液，观察起凝集结果。
扫描试验（screening test）：
测试普通抗原后，跟随其他特定试验。病人的病史是重要的参考标准。
测试普通抗原可以测定产生毒素的艰难梭菌和不产生毒素的梭菌，也是诊断假膜性肠炎（PMC），抗生素相关腹泻（AAD) 的方法。确定仍需其他特定的方法。
培养测试：
通常在培养基中加入环丝氨酸，头孢西丁和果糖，以避免其他厌氧菌的混入和替他细菌的表现，48小时后，观察其形状。最大的特点是产生臭气。 如果培养后的细菌有此特点，则可能是产生毒素的艰难梭菌和不产生毒素的梭菌，也是诊断假膜性肠炎（PMC），抗生素相关腹泻（AAD) 的方法。确定仍需其他特定的方法。
毒素检测：
是“金标准”。产毒素培养是检测艰难梭菌分离菌株的毒素产生情况，并具有较高的敏感性和相当的特异性。但其配套的设备相对昂贵，并且要求细胞培养设备，以及熟练的技能才能得到好的结果。
酶联免疫吸附测定（ELISA）：
是敏感性极高的鉴定方法，由于其设备昂贵则不作为基础检测。优点为敏感和特异性高，得到结果的时间短。